Utangulizi

Katika maabara ya kisasa ya biomedical na kemikali,mirija ya kutupwa hutumika sana katika utamaduni wa seli, athari za kemikali, uhifadhi wa sampuli na shughuli zingine muhimu.Umuhimu wao katika mchakato wa majaribio hauwezi kupuuzwa. Kwa kuwa mirija hii ya kitamaduni inagusana moja kwa moja na sampuli za majaribio, nyenzo zake, saizi yake, kufungwa na hata ikiwa imeziba au la itakuwa na athari kubwa kwenye matokeo ya majaribio. Uteuzi usiofaa unaweza kusababisha uchafuzi mtambuka, upotevu wa sampuli au upendeleo wa data wa majaribio, hivyo kuathiri usahihi na uzalishwaji wa utafiti.

Aina Kuu za Mirija ya Utamaduni Inayotumika

Kuna anuwai ya mirija ya kitamaduni inayoweza kutupwa, na watafiti wanahitaji kuchagua aina inayofaa kulingana na madhumuni ya jaribio, mazingira ya kufanya kazi na sifa za sampuli. Zimeainishwa katika nyanja tatu zifuatazo: nyenzo, uwezo na kazi maalum:

1. Uainishaji kwa nyenzo

Mirija ya kitamaduni inayoweza kutupwa iliyotengenezwa kwa vifaa tofauti hutofautiana katika upinzani wa joto, utulivu wa kemikali na mali ya macho:

• Polypropene: Upinzani mzuri kwa joto la juu na kutu kwa kemikali, yanafaa kwa utamaduni wa kawaida wa seli, majaribio ya baiolojia ya molekuli na matumizi mengine.
• Polystyrene: juu ya uwazi, rahisi kuchunguza hali ya kioevu na kiini, kawaida kutumika katika kupima macho, lakini si upinzani joto la juu, kwa kawaida haiwezi kutumika kwa autoclaving.
• Mirija ya utamaduni wa kioo: Ingawa zinaweza kutumika tena na ni thabiti kemikali, ni za gharama kubwa, zinahitaji taratibu za ziada za kusafisha na kufunga kizazi, na zinawasilisha hatari inayoweza kutokea ya uchafuzi mtambuka.

2. Uainishaji kwa uwezo

Kulingana na kiasi cha sampuli inayohitajika kwa ajili ya jaribio, uwezo wa mirija ya utamaduni huanzia ndogo hadi kiasi kikubwa:

• Mirija ya Microcentrifuge: hutumika kwa kawaida kwa utoaji wa sampuli, kunyesha katikati mwa pete, uchimbaji wa DNA/RNA na shughuli zingine.
• mirija ya kawaida ya kitamaduni: Uwezo unaotumika zaidi katika maabara, unaofaa kwa utamaduni wa seli, mmenyuko mchanganyiko, uhifadhi wa sampuli na madhumuni mengine.
• Mirija ya kitamaduni yenye uwezo mkubwa: yanafaa kwa ajili ya utamaduni wa seli kwa kiasi kikubwa au kiasi kikubwa cha usindikaji wa ufumbuzi.

3. Uainishaji kwa kazi maalum

Mirija hiyo inapatikana ikiwa na vipengele mbalimbali vya ziada ili kukidhi mahitaji mahususi ya majaribio:

• Mirija ya Aseptic kabla ya kuzaa: kiwanda kilichoimarishwa kwa mionzi ya gamma au kujifunika kiotomatiki, kinachofaa kwa majaribio yenye mahitaji ya juu ya aseptic.
• Na kofia ya cartridge: huruhusu ubadilishanaji wa gesi, unaofaa kwa vijidudu au laini za seli zinazohitaji uingizaji hewa na kuzuia uchafuzi kutoka kwa vyanzo vya nje.
• Mirija inayostahimili Joto la Chini: inaweza kutumika kwa usalama katika -80℃ au hata mazingira ya nitrojeni kioevu, yanafaa kwa uhifadhi wa muda mrefu wa joto la chini la sampuli za kibayolojia.
• Mirija iliyohitimu/isiyohitimu: Mirija iliyohitimu ni rahisi kwa kukadiria haraka na kutoa kiasi cha kioevu ili kuongeza ufanisi wa majaribio.

Mambo Muhimu katika Kuchagua Mirija ya Utamaduni

Katika mchakato wa usanifu na uendeshaji wa majaribio, uteuzi wa mirija ifaayo ya kitamaduni inayoweza kutupwa ni muhimu ili kuhakikisha ufanisi wa majaribio na usahihi wa matokeo. Watafiti wanapaswa kuzingatia kwa kina mambo kadhaa muhimu:

1. Aina ya majaribio

Mahitaji ya mirija ya utamaduni hutofautiana kwa kiasi kikubwa kutoka kwa majaribio hadi majaribio na yanapaswa kuchaguliwa kulingana na maudhui ya operesheni na mazingira ya majaribio:

• Kwa utamaduni wa seli: mahitaji ya kuzaa ni ya juu sana, na matumizi ya mirija tasa kabla ya kuzaa yenye vifuniko vya cartridge vinavyoweza kupumua ili kuhakikisha ubadilishanaji wa gesi unapendekezwa.
• Majaribio ya PCR / baiolojia ya molekuli: Haja ya kuwa na vimeng'enya vya DNA, vimeng'enya vya RNA na mirija isiyo na pyrojeni, mara nyingi hutumia neli safi ya polipropen.
• Hifadhi ya joto la chini: Mirija yenye upinzani mzuri wa joto la chini inapaswa kutumika ili kuepuka lysis kwa joto la chini.

2. Tabia za sampuli

Sifa za kifizikia za sampuli huathiri moja kwa moja uchaguzi wa nyenzo na usanidi wa utendaji wa zilizopo za kitamaduni:

• Sampuli za kioevu au dhabiti: huamua kiasi kinachohitajika na fomu ya orifice ya tube.
• Sampuli za asidi au alkali: Sampuli zenye ulikaji sana zinahitaji nyenzo zinazostahimili kemikali ili kuepuka kuharibika kwa mirija au uchafuzi.
• Kama kuepuka mwanga: Sampuli zinazohisi mwanga zinapaswa kuchagua kaharabu au mirija ya nyenzo isiyo na mwanga ili kuzuia uharibifu wa picha.

3. Mahitaji ya kuzaa

Haja ya kufunga kizazi na aina ya sterilization inayotumiwa ni mambo muhimu ya kuzingatia katika uteuzi wa neli:

• Kufunga kabla ya kuzaa dhidi ya kujifunga mwenyewe: bidhaa za kiwanda kabla ya sterilized zinafaa kwa ajili ya majaribio ya juu-throughput, kuokoa muda; ikiwa maabara ina vifaa vya kudhibiti vidhibiti vya otomatiki, unaweza kuchagua mirija ya PP inayoweza kujifunga kiotomatiki.
• Utangamano wa sterilization: Kwa mfano, nyenzo za PS hazifai kwa kuweka kiotomatiki na ni kwa matumizi moja tu.

4. Utangamano

Mirija inapaswa kubadilishwa vizuri kwa vifaa vya maabara ili kuhakikisha uendeshaji mzuri na matokeo ya kuaminika:

• Utangamano wa Centrifugal: Mirija inayotumika kupenyeza katikati inahitaji kuwa imara kimuundo ili kustahimili nguvu za katikati kwa kasi ya juu ya mzunguko.
• Utangamano wa otomatiki: Kwa majaribio ambayo yanahitaji matumizi ya roboti za bomba, mifumo ya usambazaji otomatiki, n.k., saizi za mirija sanifu lazima zitumike.

5. Gharama na uendelevu

Udhibiti unaofaa wa gharama na matumizi ya rasilimali pia ni jambo muhimu linalozingatiwa katika kukidhi mahitaji ya majaribio:

• Zinazoweza kutumika dhidi ya zinazoweza kutumika tena: zilizopo zinazoweza kutumika ni rahisi kusimamia na kuepuka uchafuzi, zinafaa kwa majaribio ya juu; mirija ya kioo inayoweza kutumika tena yanafaa kwa majaribio ya kimsingi yenye bajeti ndogo.
• Kiwango cha ununuzi: ununuzi wa kiasi kikubwa unaweza kupunguza bei ya kitengo, yanafaa kwa ajili ya miradi ya muda mrefu, mikubwa; vipimo vidogo, vilivyobinafsishwa ni rahisi zaidi lakini ni vya juu kiasi.

Mapendekezo kwa Matukio ya Kawaida ya Maombi

Kulingana na mahitaji mahususi ya aina tofauti za majaribio, mirija ifuatayo ya kitamaduni inayoweza kutupwa inapendekezwa kwa hali kadhaa za kawaida za utumaji, zinazolenga kuboresha ufanisi na kutegemewa kwa majaribio:

1. Kilimo cha seli

• Aina iliyopendekezwa: mirija ya polipropen tasa yenye vifuniko vya cartridge vinavyoweza kupumua
• Sababu: Nyenzo ya polypropen ina inertness nzuri ya kemikali na utangamano wa kibiolojia, yanafaa kwa maji ya utamaduni wa seli. Kifuniko cha cartridge kinaweza kutambua ubadilishanaji mzuri wa gesi, kuzuia uchafuzi wa vijidudu, na kukidhi mazingira ya gesi yanayohitajika kwa kuenea kwa seli.

2. Utambuzi wa molekuli ya PCR/qPCR

• Aina zilizopendekezwa: mirija maalum ya PCR isiyo na nyuklia au mirija ya microcentrifuge
• Sababu: Usafi wa juu wa zilizopo za polypropen, baada ya matibabu kali, zinaweza kuepuka uharibifu wa sampuli au uchafuzi, ili kuhakikisha matokeo sahihi na ya kuaminika ya amplification. Ubunifu wa ukuta mwembamba unapendekezwa ili kuboresha ufanisi wa uhamishaji wa joto.

3. Hifadhi ya chini ya joto

• Aina Iliyopendekezwa: Mirija ya Polypropen inayostahimili Joto ya Chini yenye Muundo wa Kuzuia Kuganda kwa Kuganda na Kifuniko cha Muhuri wa Parafujo
• Sababu: Mirija hii inaweza kutumika kuhifadhi sampuli kwa muda mrefu katika -80°C au hata katika nitrojeni ya kioevu, na muundo maalum huzuia mrija kutokana na kupasuka na sampuli kuvuja. Inafaa kwa uhifadhi wa muda mrefu wa mistari ya seli, sampuli za damu, protini au asidi ya nucleic.

4. Centrifuge

• Aina zilizopendekezwa: mirija ya polipropen inayoweza kustahimili hali ya juu, muundo wa chini wa pande zote au wa koni, na rota za centrifuge
• Sababu: Mirija ya PP ina upinzani mzuri wa centrifugal na inaweza kuhimili nguvu za juu za centrifugal bila deformation au kupasuka. Sehemu ya chini ya koni husaidia kukusanya seli au kunyesha katikati na kuongeza kasi ya uokoaji.

Makosa ya Kawaida na Njia za Kuepuka

Katika mazoezi, kushindwa kwa majaribio kutokana na uteuzi usiofaa wa zilizopo za utamaduni hutokea mara kwa mara. Makosa kadhaa ya kawaida na mapendekezo yanayolingana ya suluhisho yameorodheshwa hapa chini kwa marejeleo ya watafiti:

1. Matumizi mabaya ya vifaa visivyo na joto la juu kwa autoclaving